作者：漯河市中心醫(yī)院檢驗科 朱俊民
自身免疫性抗體檢測是自身免疫性疾診治中的重要工具。隨著早期診斷、規(guī)范化治療的開展，自身抗體檢測在疾病診斷、監(jiān)測、以及預后評估中發(fā)揮的作用，日益受到臨床醫(yī)生重視。我院很早就成立了風濕免疫科，為了滿足不斷增加的患者需求，2019年年底風濕免疫科從血液風濕科分離出來，成立了獨立的風濕免疫科病區(qū)。我院檢驗中心同時開展了自身免疫性抗體的相關檢測，助力于臨床醫(yī)生的整個診療過程。在此對自身免疫病、自身免疫性抗體檢測和應用做一概述，為臨床醫(yī)生、檢驗醫(yī)師和自免患者提供參考。
一 自身免疫性疾概述
自身免疫性疾病是由于免疫功能紊亂，機體產(chǎn)生針對自身抗原的病理性免疫應答，從而引起器官或系統(tǒng)損傷的一類疾病。根據(jù)臨床表現(xiàn)和病變累及的范圍，自身免疫性疾病可以分為系統(tǒng)性自身免疫病和器官特異性自身免疫病。前者以系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE）、系統(tǒng)性硬化癥(SSG)、類風濕關節(jié)炎（RA）、抗磷脂綜合征(APS)等為代表；后者包括自身免疫性肝炎(AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC)、自身免疫性甲狀腺炎(AIT)、胰島素依賴性糖尿?。↖DDM）。免疫性疾病的發(fā)病機制尚不完全清楚，目前認為是遺傳易感個體在環(huán)境因素如感染、紫外線、腫瘤、藥物等多種因素共同作用下發(fā)生。
二 自身抗體的分類、臨床意義和檢測方法
1 系統(tǒng)性自身免疫性疾病相關抗體
(1)抗核抗體(ANA)
抗核抗體(ANA)是一組將自身真核細胞的各種成分脫氧核糖核蛋白、DNA可提取核抗原和RNA等作為靶抗原的自身抗體的總稱，是系統(tǒng)性自身免疫疾病最重要的診斷指標之一。ANA的檢測方法很多，目前間接免疫熒光法仍然是ANA檢測首選方法。ANA陽性提示體內(nèi)存在一種或多種自身抗體，應結合其他臨床資料判定其意義。
(2)抗可提取核抗原(ENA)抗體譜
ANA的靶抗原眾多，采用鹽析法從細胞核中提取出來，且不含DNA的一類抗原統(tǒng)稱為ENA。臨床常用抗ENA抗體主包括抗Sm、U1—RNP、SSA、SSB、Jo-1、Scl-70和核糖體P蛋白抗體等。其中抗U1-RNP抗體可在多種風濕性疾病出現(xiàn)，但高滴度抗U1-RNP抗體對混合性結締組織?。∕CTD)有診斷意義?？筍m抗體是SLE高度特異性的血清學標記物?？筍S-A和/或抗SS-B陽性是診斷干綜合征的血清標志物?？筍c-70抗體是系統(tǒng)性硬化癥分類標準中的血清學標記物?？笿O-1抗體在皮肌炎（DM）或多發(fā)性肌炎(PM)患者中的陽性率約為25%-30%。目前這些抗體常用檢測方法是化學發(fā)光免疫法和免疫印跡法（IB）。
(3)抗雙鏈DNA(dsDNA) 抗體
該自身抗體對診斷SLE有較高的特異性（95%）， 是SLE分類標準之一，其抗體滴度在多數(shù)SLE患者中與病情活動程質(zhì)相關，可作為治療監(jiān)測和預后評價的指標。目前公認的檢測方法為間接免疫熒光法(IIF)和化學發(fā)光免疫法。
(4)抗核小體抗體(AnuA)
抗核小體抗體可出現(xiàn)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的早期,并且敏感性、特異性均較高。SLE患者中陽性率為50%-90%，特異性>90%，目前常用的檢測方法為化學發(fā)光免疫法。
(5)抗C1q抗體
抗C1q抗體除與低補體血癥蕁麻疹性血管炎、類風濕關節(jié)炎等相關外，與SLE患者并發(fā)狼瘡性腎炎及其活動性也密切相關，目前常用的檢測方法化學發(fā)光免疫法。
(6)抗磷脂抗體譜
抗磷脂抗體譜主要包括狼瘡抗凝物(LA)、抗心磷脂（CL）抗體、抗B2-糖蛋白1(B2-GP1)抗體、抗凝血酶原（PT)抗體和抗磷脂酰絲氨酸(PS）抗體等，在我國SLE患者中檢出率約內(nèi)20%6-30%，是SLE預后不良的重要標志不。檢測LA或抗CL-IgG/IgM或抗β2-GP1-IgG/IgM是診斷抗磷脂綜合征（APS)的血清學標志物。LA通過體外凝血時間來定性測定，其它抗體常通過化學發(fā)光免疫法進行定量檢測。
?。?）抗中性粒細胞胞漿抗體 ANCA
ANCA的靶抗原有十余種，與臨床最相關的是蛋白酶3（PR3）和髓過氧化物酶（MPO）,兩者與ANCA相關血管炎，即肉芽腫性多血管炎(GPA)、酸性肉芽腫性多血管炎（EGPA)以及這些疾病的腎肚表現(xiàn)切相關的(和ELISA聯(lián)合應用是檢調(diào)ANCA的最佳方法
（8)抗內(nèi)皮細胞抗體（AECA)
AECA與血管炎和多種風濕病中的血管內(nèi)皮損傷有關，如白塞病、肉芽腫性多血簡炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性硬化癥、過敏性紫癜腎炎(HSPN)等?？贵w滴度與病情活動性具有相關性。目前檢測AECA常用的方法是ELISA和化學發(fā)光法。
?。?）類風顯因子RF
IgM- RF在類風濕關節(jié)炎(RA)患者中的陽性率為70%-90%,IgA-RF和IgG-RF對類風濕關節(jié)炎的診斷也可能有一定提示意義。免疫比濁法、 ELISA和化學發(fā)光法是目前常用的RF定量檢測方法。除RA外，RF也可見于其它自身免疫性病、多種感染以及腫瘤性疾病等。
10）抗瓜氨酸化蛋白/肽抗體(ACPA)
ACPA是一組對RA高度特異的自身抗體，可出現(xiàn)在類風濕關節(jié)炎早期，同時與類風濕關節(jié)炎病情活動性指標呈相關性，目前常用檢測方法為間接免疫獲光法?？弓h(huán)瓜氨肽CCP）抗體是RA最新的分類標準中的血清學檢測項目之一，敏感性、特異性均較好。目前檢測的最常用方法是化學發(fā)光法。
2 自身免疫性肝?。ˋILD）相關自身抗體
自身免疫性肝炎（AIH）和原發(fā)性膽計性肝硬化(PBC)相關ANA譜
ANA在AIH患者中陽性率可高達70%-80%,是疾病診斷評分的指標之一，但是缺乏疾病特異性。PBC患者ANA陽性率為50%左右，在抗線粒體抗體(AMA)陰性PBC患者中的陽性率可達85%。AMA是PBC的標志性抗體，陽性率在90%-95%之間。
根據(jù)靶抗原不同分為9個亞類，即M1~M9,與PBC緊密相關的是M2、M4M8和M9 AMA-M2是PBC特異性和敏感度最強的診斷指標，M4常與M2并存，而M9陽性常提示患者處于PBC的早期。IIF和化學發(fā)光法，常用于AMA篩查.區(qū)分亞型常用免疫印邊法。
三 《自身抗體檢測在自身免疫性疾病中的臨床應用專家建議十三條
本《建議》為廣大臨床醫(yī)生和檢驗醫(yī)師在日常療實踐中擬定檢測項目及檢測流程時提供參考、自身抗體檢測的合理應用有賴于檢驗醫(yī)生和臨床醫(yī)生的共同合作。
(1)對臨床懷疑有自身免疫性疾病的患者建議進行自身抗體的檢測。疾病分類或診斷標準中列出的自身抗體應在檢測之列。需要結合患者病史、癥狀、體征及自身抗體水平等對自身免疫性疾病進行診斷及鑒別診斷。
(2)自身抗體的檢測建議選用國際推薦（或公認)的檢洲方法
自身抗體常用的檢測方法包括間接免疫蘇光法、免疫印跡法、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫散射比濁法、化學發(fā)光免疫法、免疫膠體金法、乳膠凝集法、放射免疫法、免疫斑點法等。目前國內(nèi)常用的定性檢測方法較多，國外更多采用定量檢測方法。
(3)自身抗體的檢測結果建議以定量或半定量方式表達
自身抗體檢測結果應盡可能以定量方式表達如無法進行定量檢測，建議選用半定量方式，對臨床有更好的參考意義。部分自身抗體超過正常值上限三倍以上可視為高滴度陽性。定量或半定量顯示結果有利于疾病前后或治療前后進行比較，對疾病的監(jiān)測和療效評估有重要價值。
(4)當自身抗體檢驗結果與臨床情況不符時，建議結合患者性別、年齡、病史及其它實驗室指標等特點，對檢驗結果作出適當解釋及下一步建議。
對臨床高度疑似自身免疫性疾病的患者，如果某一種方法檢測自身抗體結果為陰性或轉陽性，或當陽性的檢測結果與臨床特點不符時建議使用另二種檢測方法對結果加以確認。臨床醫(yī)師和檢驗科醫(yī)師應在必要時針對患者的臨床及實驗室結果特點進行溝通，共同商議決定下出步檢測項目或給患者何種建議。
