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      科普 || 自身免疫性抗體在自免疾病診療中的應(yīng)用

      來自: 本網(wǎng) 時(shí)間:2024-04-25 點(diǎn)擊率:

        

        

           作者:漯河市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 朱俊民

        

        自身免疫性抗體檢測(cè)是自身免疫性疾診治中的重要工具。隨著早期診斷、規(guī)范化治療的開展,自身抗體檢測(cè)在疾病診斷、監(jiān)測(cè)、以及預(yù)后評(píng)估中發(fā)揮的作用,日益受到臨床醫(yī)生重視。我院很早就成立了風(fēng)濕免疫科,為了滿足不斷增加的患者需求,2019年年底風(fēng)濕免疫科從血液風(fēng)濕科分離出來,成立了獨(dú)立的風(fēng)濕免疫科病區(qū)。我院檢驗(yàn)中心同時(shí)開展了自身免疫性抗體的相關(guān)檢測(cè),助力于臨床醫(yī)生的整個(gè)診療過程。在此對(duì)自身免疫病、自身免疫性抗體檢測(cè)和應(yīng)用做一概述,為臨床醫(yī)生、檢驗(yàn)醫(yī)師和自免患者提供參考。

        一 自身免疫性疾概述

        自身免疫性疾病是由于免疫功能紊亂,機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)自身抗原的病理性免疫應(yīng)答,從而引起器官或系統(tǒng)損傷的一類疾病。根據(jù)臨床表現(xiàn)和病變累及的范圍,自身免疫性疾病可以分為系統(tǒng)性自身免疫病和器官特異性自身免疫病。前者以系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、系統(tǒng)性硬化癥(SSG)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)、抗磷脂綜合征(APS)等為代表;后者包括自身免疫性肝炎(AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)、自身免疫性甲狀腺炎(AIT)、胰島素依賴性糖尿?。↖DDM)。免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚,目前認(rèn)為是遺傳易感個(gè)體在環(huán)境因素如感染、紫外線、腫瘤、藥物等多種因素共同作用下發(fā)生。

        二 自身抗體的分類、臨床意義和檢測(cè)方法

        1 系統(tǒng)性自身免疫性疾病相關(guān)抗體

        (1)抗核抗體(ANA)

        抗核抗體(ANA)是一組將自身真核細(xì)胞的各種成分脫氧核糖核蛋白、DNA可提取核抗原和RNA等作為靶抗原的自身抗體的總稱,是系統(tǒng)性自身免疫疾病最重要的診斷指標(biāo)之一。ANA的檢測(cè)方法很多,目前間接免疫熒光法仍然是ANA檢測(cè)首選方法。ANA陽(yáng)性提示體內(nèi)存在一種或多種自身抗體,應(yīng)結(jié)合其他臨床資料判定其意義。

        (2)抗可提取核抗原(ENA)抗體譜

        ANA的靶抗原眾多,采用鹽析法從細(xì)胞核中提取出來,且不含DNA的一類抗原統(tǒng)稱為ENA。臨床常用抗ENA抗體主包括抗Sm、U1—RNP、SSA、SSB、Jo-1、Scl-70和核糖體P蛋白抗體等。其中抗U1-RNP抗體可在多種風(fēng)濕性疾病出現(xiàn),但高滴度抗U1-RNP抗體對(duì)混合性結(jié)締組織?。∕CTD)有診斷意義??筍m抗體是SLE高度特異性的血清學(xué)標(biāo)記物??筍S-A和/或抗SS-B陽(yáng)性是診斷干綜合征的血清標(biāo)志物??筍c-70抗體是系統(tǒng)性硬化癥分類標(biāo)準(zhǔn)中的血清學(xué)標(biāo)記物。抗JO-1抗體在皮肌炎(DM)或多發(fā)性肌炎(PM)患者中的陽(yáng)性率約為25%-30%。目前這些抗體常用檢測(cè)方法是化學(xué)發(fā)光免疫法和免疫印跡法(IB)。

        (3)抗雙鏈DNA(dsDNA) 抗體

        該自身抗體對(duì)診斷SLE有較高的特異性(95%), 是SLE分類標(biāo)準(zhǔn)之一,其抗體滴度在多數(shù)SLE患者中與病情活動(dòng)程質(zhì)相關(guān),可作為治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)價(jià)的指標(biāo)。目前公認(rèn)的檢測(cè)方法為間接免疫熒光法(IIF)和化學(xué)發(fā)光免疫法。

        (4)抗核小體抗體(AnuA)

        抗核小體抗體可出現(xiàn)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的早期,并且敏感性、特異性均較高。SLE患者中陽(yáng)性率為50%-90%,特異性>90%,目前常用的檢測(cè)方法為化學(xué)發(fā)光免疫法。

        (5)抗C1q抗體

        抗C1q抗體除與低補(bǔ)體血癥蕁麻疹性血管炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等相關(guān)外,與SLE患者并發(fā)狼瘡性腎炎及其活動(dòng)性也密切相關(guān),目前常用的檢測(cè)方法化學(xué)發(fā)光免疫法。

        (6)抗磷脂抗體譜

        抗磷脂抗體譜主要包括狼瘡抗凝物(LA)、抗心磷脂(CL)抗體、抗B2-糖蛋白1(B2-GP1)抗體、抗凝血酶原(PT)抗體和抗磷脂酰絲氨酸(PS)抗體等,在我國(guó)SLE患者中檢出率約內(nèi)20%6-30%,是SLE預(yù)后不良的重要標(biāo)志不。檢測(cè)LA或抗CL-IgG/IgM或抗β2-GP1-IgG/IgM是診斷抗磷脂綜合征(APS)的血清學(xué)標(biāo)志物。LA通過體外凝血時(shí)間來定性測(cè)定,其它抗體常通過化學(xué)發(fā)光免疫法進(jìn)行定量檢測(cè)。

       ?。?)抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體 ANCA

        ANCA的靶抗原有十余種,與臨床最相關(guān)的是蛋白酶3(PR3)和髓過氧化物酶(MPO),兩者與ANCA相關(guān)血管炎,即肉芽腫性多血管炎(GPA)、酸性肉芽腫性多血管炎(EGPA)以及這些疾病的腎肚表現(xiàn)切相關(guān)的(和ELISA聯(lián)合應(yīng)用是檢調(diào)ANCA的最佳方法

       ?。?)抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)

        AECA與血管炎和多種風(fēng)濕病中的血管內(nèi)皮損傷有關(guān),如白塞病、肉芽腫性多血簡(jiǎn)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性硬化癥、過敏性紫癜腎炎(HSPN)等。抗體滴度與病情活動(dòng)性具有相關(guān)性。目前檢測(cè)AECA常用的方法是ELISA和化學(xué)發(fā)光法。

       ?。?)類風(fēng)顯因子RF

        IgM- RF在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)患者中的陽(yáng)性率為70%-90%,IgA-RF和IgG-RF對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的診斷也可能有一定提示意義。免疫比濁法、 ELISA和化學(xué)發(fā)光法是目前常用的RF定量檢測(cè)方法。除RA外,RF也可見于其它自身免疫性病、多種感染以及腫瘤性疾病等。

        10)抗瓜氨酸化蛋白/肽抗體(ACPA)

        ACPA是一組對(duì)RA高度特異的自身抗體,可出現(xiàn)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎早期,同時(shí)與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病情活動(dòng)性指標(biāo)呈相關(guān)性,目前常用檢測(cè)方法為間接免疫獲光法??弓h(huán)瓜氨肽CCP)抗體是RA最新的分類標(biāo)準(zhǔn)中的血清學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目之一,敏感性、特異性均較好。目前檢測(cè)的最常用方法是化學(xué)發(fā)光法。

        2 自身免疫性肝病(AILD)相關(guān)自身抗體

        自身免疫性肝炎(AIH)和原發(fā)性膽計(jì)性肝硬化(PBC)相關(guān)ANA譜

        ANA在AIH患者中陽(yáng)性率可高達(dá)70%-80%,是疾病診斷評(píng)分的指標(biāo)之一,但是缺乏疾病特異性。PBC患者ANA陽(yáng)性率為50%左右,在抗線粒體抗體(AMA)陰性PBC患者中的陽(yáng)性率可達(dá)85%。AMA是PBC的標(biāo)志性抗體,陽(yáng)性率在90%-95%之間。

        根據(jù)靶抗原不同分為9個(gè)亞類,即M1~M9,與PBC緊密相關(guān)的是M2、M4M8和M9 AMA-M2是PBC特異性和敏感度最強(qiáng)的診斷指標(biāo),M4常與M2并存,而M9陽(yáng)性常提示患者處于PBC的早期。IIF和化學(xué)發(fā)光法,常用于AMA篩查.區(qū)分亞型常用免疫印邊法。

        三 《自身抗體檢測(cè)在自身免疫性疾病中的臨床應(yīng)用專家建議十三條

        本《建議》為廣大臨床醫(yī)生和檢驗(yàn)醫(yī)師在日常療實(shí)踐中擬定檢測(cè)項(xiàng)目及檢測(cè)流程時(shí)提供參考、自身抗體檢測(cè)的合理應(yīng)用有賴于檢驗(yàn)醫(yī)生和臨床醫(yī)生的共同合作。

        (1)對(duì)臨床懷疑有自身免疫性疾病的患者建議進(jìn)行自身抗體的檢測(cè)。疾病分類或診斷標(biāo)準(zhǔn)中列出的自身抗體應(yīng)在檢測(cè)之列。需要結(jié)合患者病史、癥狀、體征及自身抗體水平等對(duì)自身免疫性疾病進(jìn)行診斷及鑒別診斷。

        (2)自身抗體的檢測(cè)建議選用國(guó)際推薦(或公認(rèn))的檢洲方法

        自身抗體常用的檢測(cè)方法包括間接免疫蘇光法、免疫印跡法、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫散射比濁法、化學(xué)發(fā)光免疫法、免疫膠體金法、乳膠凝集法、放射免疫法、免疫斑點(diǎn)法等。目前國(guó)內(nèi)常用的定性檢測(cè)方法較多,國(guó)外更多采用定量檢測(cè)方法。

        (3)自身抗體的檢測(cè)結(jié)果建議以定量或半定量方式表達(dá)

        自身抗體檢測(cè)結(jié)果應(yīng)盡可能以定量方式表達(dá)如無(wú)法進(jìn)行定量檢測(cè),建議選用半定量方式,對(duì)臨床有更好的參考意義。部分自身抗體超過正常值上限三倍以上可視為高滴度陽(yáng)性。定量或半定量顯示結(jié)果有利于疾病前后或治療前后進(jìn)行比較,對(duì)疾病的監(jiān)測(cè)和療效評(píng)估有重要價(jià)值。

        (4)當(dāng)自身抗體檢驗(yàn)結(jié)果與臨床情況不符時(shí),建議結(jié)合患者性別、年齡、病史及其它實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)等特點(diǎn),對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果作出適當(dāng)解釋及下一步建議。

        對(duì)臨床高度疑似自身免疫性疾病的患者,如果某一種方法檢測(cè)自身抗體結(jié)果為陰性或轉(zhuǎn)陽(yáng)性,或當(dāng)陽(yáng)性的檢測(cè)結(jié)果與臨床特點(diǎn)不符時(shí)建議使用另二種檢測(cè)方法對(duì)結(jié)果加以確認(rèn)。臨床醫(yī)師和檢驗(yàn)科醫(yī)師應(yīng)在必要時(shí)針對(duì)患者的臨床及實(shí)驗(yàn)室結(jié)果特點(diǎn)進(jìn)行溝通,共同商議決定下出步檢測(cè)項(xiàng)目或給患者何種建議。

        

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